我国猪伪狂犬病疫苗研究及应用现状

猪伪狂犬病（英文名称Pseudorabies，PR）是伪狂犬病病毒（英文名称Pseudorabiesvirus，PRV）引起的高度接触性传染病，家畜的主要症状有奇痒、发热、脑脊髓炎和繁殖障碍等症状，一旦疫病发生，很难进行根除，给养殖业造成巨大的经济损失。

目前，对该病的防控，国内外均以疫苗免疫预防为主，结合伪狂犬病毒gE抗原和gE抗体检测淘汰、净化野毒感染猪。目前，国内外临床应用的PR疫苗大体可分为以下三类：一是将分离的野毒或强毒经甲醛灭活后，加佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗；二是将分离的野毒或强毒经非猪源细胞或者鸡胚反复传代致弱研制的弱毒疫苗；三是利用基因工程技术构建的基因缺失疫苗。这些疫苗在PR的防控方面起到非常重要的作用。此外，一些基因工程疫苗例如核酸疫苗、亚单位疫苗及重组疫苗尚在研究之中。

根据公开信息，目前国内新注册了3种兽药产品（包括2种猪伪狂犬疫苗以及1种检测试剂盒），共47家企业获得9种兽药产品（包括7种疫苗和2种检测试剂盒）有效批准文号65个。

目前在有效期内的已注册进口兽药来自以硕腾公司、西班牙海博莱生物大药厂为主的五家企业。

目前我国临床使用的PR灭活疫苗主要是PRV Ea株全病毒油乳剂灭活疫苗，但由于该疫苗不能区别免疫猪和野毒感染猪，在PR基因缺失活疫苗上市以来临床上使用越来越少。

PR弱毒疫苗是将分离到的野毒株经非猪源细胞或鸡胚反复传代，或在高于一般培养温度条件下加入致突变剂在细胞培养基上反复传代而获得。由于其特殊的自然基因缺失的特点，再加之免疫原性优良，生产工艺简便易行，在控制及净化世界范围PR的流行中起到至关重要的作用。目前，已经报道的PR弱毒疫苗有Bartha-K61株、Bucharest株和JS-2012-F120株。其中Bartha-K61和Bucharest株弱毒疫苗应用最为广泛。

总的来说，虽然自然弱毒疫苗价格低廉，在伪狂犬病防制方面有着较强的免疫效果，但其主要毒力基因TK没有缺失，故其毒力返强的可能性很大，有可能导致疫病的流行，而且未经充分致弱或过度致弱的疫苗株不仅不能诱导满意的免疫保护反应，反而有可能引起疫病及免疫抑制。弱毒疫苗还可导致潜伏感染，存在散毒的可能，在部分接种的猪血清中虽然存在中和抗体，但其排毒期却可持续数年。因此许多国家已禁止使用弱毒疫苗，而以TK基因缺失的基因缺失疫苗取代。

PR基因工程缺失疫苗是利用基因工程操作技术将PRV基因中对生长非必需毒力基因或糖蛋白基因进行切除或插入，使其彻底失活，但又保持PRV的免疫原性而获得的疫苗。已经报道的PRV基因缺失疫苗主要有三种：单基因缺失疫苗、双基因缺失疫苗和多基因缺失疫苗。目前我国市场上应用的主要是HB-98株双基因缺失疫苗(TK基因和gG基因)和刚上市的SA215株三基因缺失疫苗（gE基因、gI基因和TK基因）。

近几年申请临床试验审批的疫苗主要为以下几种：

亚单位疫苗是将PRV保护性抗原基因在原核或真核系统中表达所获得的产物制成的疫苗。它具有许多优点:（1）安全性好，疫苗中不含任何病原微生物，接种动物后不会发生急性、持续或潜伏感染，可用于不宜使用活疫苗的情况，如妊娠动物。（2）可以减少或消除常规活疫苗或灭活疫苗难以避免的热原、变应原、免疫抑制原或其他有害的反应原。（3）疫苗稳定性好，便于保存和运输。（4）产生的免疫应答可以与野毒感染所产生的应答相区分，有利于疫病的控制和消灭。（5）可以大量生产。

核酸疫苗最大的优点是能克服伪狂犬病病毒的潜伏感染，而且能激发细胞免疫，因此受到人们的青睐，同时其具有操作简单、成本低廉和安全等特点，颇具开发潜力。自上世纪90年代DNA疫苗诞生后，人们在对其免疫机理、免疫方法、途径及免疫佐剂等进行积极研究的同时，不断地认真审视和研究DNA免疫可能存在的缺陷，如免疫后能否产生抗DNA抗体、免疫耐受或超免反应以及是否会导致宿主细胞恶性转化等。其中，人们最为关注的是DNA疫苗能否导致宿主细胞恶性转化，这也是DNA疫苗难以应用于临床的最大障碍。

2017年，国产兽用制品批签发集中在东方帝维、武汉科前、四川华神、中牧实业四家企业，且以活疫苗为主，43家生产企业对8种猪伪狂犬疫苗共进行了1434次批签发。

进口兽用生物制品主要代理机构为中国牧工商（集团）总公司及北京康牧众诚动物药品有限公司，生产企业主要为勃林格殷格翰动物保健（美国）有限公司、硕腾公司、梅里亚有限公司以及西班牙海博莱生物大药厂。2017年全年，6家生产企业对9种猪伪狂犬疫苗进行了225次批签发。

近两年来我国兽医科研工作者已经在预防PR疾病和净化PR方面取得重要进展，新的PR流行变异株基因缺失疫苗也相继被研究成功，虽然新疫苗距离临床使用仍需一段时间，但我们相信在广大兽医研究工作者的共同努力下，新的PR流行株疫苗将在PR预防、控制和净化过程中发挥重要作用。

（中国兽药信息网、中农威特生物科技股份有限公司、天津市农业科学院、中国动物保健综合综合整理）