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猪水疱性口炎病毒基因及其疫苗的研究进展

猪水疱性口炎(Swine vesicular stomatitis,SVS)是由于水疱性口炎病毒(VSV)感染引起的高度接触传染性的病毒性疾病[1]。该病毒属于小RNA病毒科(Picornaviridae),肠道病毒属(Enterovirus),与人柯萨奇病B5 (Coxsackievirus B5,CB5)有密切的遗传关系[2]。临床症状主要表现在以舌部、唇部、口腔黏膜和蹄冠等处的上皮组织发生水疱性炎症。SVS可引起地方及甚至多个国家的广泛性流行,临床表现与猪口蹄疫(FMD)、猪水疱性疹(SVES)和猪水疱病(SVD)等疫病难以区别[3]。VSV主要有2种血清型,它们分别是印第安型(IND)和新泽西型(NJ),代表的毒株为印第安纳株(VSV-IN)和新泽西株(VSV-NJ),本病被国际兽医局(OIE)列为必须通报的传染病[4],在我国VSV为外境来源的动物传染病。早在19世纪初,该病就在美国东部暴发过,被称作“舌溃疡”。到了1916年,VSV从北美洲传到了欧洲并引起了地方大面积流行性。使该病在美洲、欧洲、非洲及亚洲等多个国家和地区引起猪、马、牛群发病,造成的惨重经济损失。我国于2009年已有该病的报道,该病主要随着进境商品传入中国,造成国内大量的牲畜感染而死亡,特别在养猪业带来了严重的影响。
1 病原学
  水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)属弹状病毒科,水疱性口炎病毒属的成员,通过血清中和试验和免疫补体结合的试验,可将VSV分为两中血清型,即新泽西型(NJ)和印第安纳型(IND)[5],而印第安纳型又可分为3种亚型。VSV与在琼扩试验中可出现两条沉淀线,可区分这两种血清型。1964年,在稻鼠身上的螨体内分离到一株毒,该毒株的形态上与VSV十分相似,血清学与VSV-IN有一定的关系,但与VSV-NJ没有相关性,此毒株在特立尼达被命名为 Cocal株。通过研究VSV(包括从巴西和阿根廷的马体内分离到的巴西株)显示, VSV-IN一般可分为3个亚型。即印第安纳I型、印第安纳Ⅱ型和印第安纳Ⅲ型。该3种亚型的分离主要来自牛、马、猪、昆虫和人等体内的毒株。  VSV呈子弹状或圆柱状,即一端呈圆弧形,而另一端平坦,纯化后的粒子呈明显的圆筒状。其大小为150~180×50~70nm。通过电镜下观察可以看出,病毒粒子表面具有囊膜结构。病毒粒子内部的核衣壳呈密集卷曲的螺旋状结构。其外径约49nm,内径约29nm。另外,在电镜下常可以看到T型结构,T型结构内含有正常病毒粒子的全部结构蛋白,但没有转录酶活性,其RNA含量只占到正常含量的1/3左右[6]。  该病的生态学分布场所主要在沿河和林区昆虫活动常发生,表明该病由昆虫传播。印第安纳I和新泽西两种血清型都能从沙蝇分离到的,并已证明经卵可以垂直传播。感染新泽西型的沙蝇可将VSV传播给乳鼠。已证明晚春昆虫活跃季节野猪新泽西血清型抗体为阳性。黑蝇舔食新泽西病毒液后以唾液传播可达10d之久。在猪的VSV传播中主要是因为污染物参与而增加感染传染的机率。接触传染亦可发生,但只有皮肤擦伤才会感染。  Nichol等根据VSV新泽西型毒株T1核酸酶指纹图研究显示,其野毒株可分为14个基因型。通过对多个新泽西型毒株糖蛋白核酸序列和氨基酸组成进行分析比较发现,不同毒株间核酸变异度可达19.8%,而氨基酸变异度为8.5%。分析不同毒株间的进化关系,可将VSV新泽西血清型分也可为3个基本亚型。在美国和墨西哥地区流行的毒株属于大多属于1亚型;来自于萨尔瓦多和洪都拉斯等国家的毒株属于2亚型;来自尼加拉瓜和巴拿马的毒株属于3亚型。VSV与其它病毒一样,囊膜糖蛋白抗原可使动物产生中和抗体,呈现不同毒株的特异性。但在小RNA病毒科中,目前还没有证实其它病毒属成员具有VSV的抗原成分。研究显示,在中和试验和补体结合试验中,VSV与狂犬病毒属的病毒均没有任何交叉反应。  VSV的感染细胞时可产生血凝素,维持液内不含血清的适宜条件与狂犬病病毒相似,但加0.4%牛血清后,在pH 6.2 、4℃的条件下,可以凝集鹅红细胞。病毒不会在凝集的红细胞表面脱落下来。洗脱被凝集的鹅红细胞上的病毒粒子,红细胞还可以再次凝集,从而证明VSV没有受体破坏酶。VSV对理化学因素的抵抗力都十分的敏感。在58℃ 条件下存活30min,紫外线、乙醚、氯仿等有机溶剂都能使其灭活。病毒可在土壤中于4~6℃条件下活存几天。但该病毒在pH 4~10之间时表现较为稳定。该病毒既不耐酸更不耐碱,2%的NaOH溶液中或l%的甲醛溶液能在几分钟内迅速被灭活。0.05%结晶紫可以使其失去感染能力,在1%石炭酸需要6h以上才能将其灭活。病毒在5%甘油磷酸盐缓冲液内可存活4个月。在感染的细胞培养液中加入2%胎牛血清,可以明显提高VSV的稳定性。
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本文全文刊于本杂志2012年6月刊,可从知网下载或向本刊订阅。   
  

声明:本文为原创,作者为 刘 少娟,转载时请保留本声明及附带文章链接:http://www.zgdwbj.com/archives/10624
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觉得不好少打点:)

最后编辑于:2013/8/11作者: 刘 少娟

该用户很懒,还没有介绍自己。

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