日本乙型脑炎(Japanese encephalitis，JE)简称乙脑，是由乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV，乙脑病毒)经蚊虫传播引起的严重的人畜共患传染病。该病主要侵犯患病动物或人的丘脑、脊髓、角细胞、大脑皮质和小脑，引起严重的中枢神经系统损伤。动物感染JEV后的有30％的会死亡，存活下来的50％的动物会留下神经系统后遗症[1]，WHO(组织)已将JE列为重点防控的传染病。JE主要在亚洲流行，在我国除少数省份外全国各地均有JE流行，不仅对人畜的健康造成极大的危害，还对养殖业造成极大地经济损失，被我国卫生部门列为乙类传染病。澳大利亚和关岛地区由于近年来全球气候的变暖，乙型脑炎的流行区域也在不断扩大而出现乙脑病例。目前对于JE尚无特效治疗方法，因此预防JE的发生非常重要，而疫苗又是控制JE发生的最佳手段，尽管我国生产的SA14-14-2弱毒活疫苗在预防人的日本乙型脑炎的发生起到了重要的作用，但活疫苗毕竟是一种活的微生物，有可能出现毒力反强、带毒、排毒、垂直传播、核酸重组等现象，因此，寻求稳定、安全及新型的日本乙型脑炎疫苗，已经成为近年的研究热点。
1 乙型脑炎病毒NS1基因结构与功能
日本乙型脑炎病毒(JEV)基因组全长约为11Kb，为单股正链RNA，其基因组包含5′端非编码区（5′-NCR）和3′端非编码区（3′-NCR）及一个大小约10.3Kb的单一开放阅读框（ORF），该ORF几乎跨越整个基因组，无亚基因组结构。单一开放阅读框编码3种结构蛋白：衣壳蛋白(C)、前膜/膜蛋白(PrM/ M)和外膜糖蛋白(E)，以及7种非结构蛋白（NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B、NS5），各基因顺序为：5′-C-PrM/M-E-NSl-NS2A-NS2B-NS3-NS4A-NS4B-NS5-3′。其中NS1是一个含高甘露糖分泌型糖蛋白，分子量约为40kDa，由于在130位和207位存在N-连接糖链，因此在感染细胞内其实际分子量为46kDa左右。在感染细胞的高尔基体和内质网内，E蛋白和NS1蛋白形成一种稳定的复合物，其半衰期长，共同滞留一段时间后，附着于感染细胞表面，且不被分泌到细胞外去，该复合物并不是前体蛋白的不完全水解而是在病毒复制周期中产生的一种非特异性异聚蛋白，没有生物学功能。Mason等[2]用E.coli来表达乙型脑炎病毒抗原，实验表明在乙型脑炎病毒感染的细胞中，NS1蛋白以NS1′和NS1两种形式存在，NS1和NS1′在N末端具有相同的序列，NS1′在C末端还存在一段由基因组的NS2a基因编码的高度疏水的氨基酸序列，NS1′的形成机制目前还不清楚。NS1和NS1′的二聚体存在于JEV感染的细胞液和单层细胞中，该二聚体不耐热耐SDS。Homodimer认为NS1以二聚体形式出现是乙脑病毒感染的一个特点。Flamand[3]等用重组杆状病毒表达NS1，发现细胞外的NS1二聚体自由存在或与膜相互作用形成复合物。 NS1是乙型脑炎病毒主要的抗原成分之一，其具体功能目前还不够清楚，推测其与膜功能相关，可能参与乙型脑炎病毒复制、组装和释放[4]。它不组成毒粒，具有补体结合活性，但没有血凝抑制活性和中和活性，在没有中和抗体的条件下，NS1可诱生依赖于抗体的Fc片段的保护力。有研究显示NS1表达质粒可激发CTL反应，再者NS1基因和及其表型具有高度同源性，因此NS1基因可作为RT-PCR检测和亚单位疫苗研究的材料。因为NS1可使宿主产生保护性免疫而没有抗体依赖性增强(ADE)作用，因此NS1作为亚单位疫苗比灭活疫苗更有优势[5]。
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本文全文刊于本杂志2012年12月刊，可从知网下载或向本刊订阅。
原创文章，作者：刘 少娟，如若转载，请注明出处：http://zgdwbj.com/archives/10594
